山西福彩网

您好,欢迎来到试剂仪器网! [登录] [免费注册]
试剂仪器网
位置:山西福彩网 > 资料中心 > 技术文章 > 文章内容
人结合珠蛋白/触珠蛋白ELISA检测试剂盒操作流程
2020.03.05   点击340次

人结合珠蛋白/触珠蛋白ELISA检测试剂盒操作流程:

山西福彩网(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。

(2)酶标板置4℃,包被过夜。

(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。

(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。

(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。

(6)洗板,同(4)。

(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。

(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。

(9)洗板,同(4)。

(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。

(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。

(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。

(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

相关产品
上海天天彩选4 河北快3基本走势 辽宁11选5 河南福彩网 黑龙江11选5 河北福彩网 黑龙江11选5 浙江体彩6+1玩法 青海快3走势 上海天天彩选4走势图