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大鼠Smad同源物7(Smad7) elisa试剂盒实验中出现假阳性的原因?
2020.08.26   点击300次

大鼠Smad同源物7 (Smad7) elisa试剂盒实验中出现假阳性或者假阴性的原因?

答:水质原因,可以点复溶液验证,或者用纯净水。

实验操作原因,包括吸取到其它相吹干,离心不彻底,样本的污染,乳化未处理完全。可以准确的取样吹干,延长离心时间,更换样本,温浴(70℃)处理乳化现象。

仪器试剂原因,离心管未清洗干净。有机溶剂的影响,可以做试剂空白看影响结果。

衍生化试剂原因(长时间衍生化试剂变质)。

问题:实验操作中显示和比色的注意事项?

答:TMB 经 HRP 作用后,约 40 分钟显色达顶峰,随即逐渐减弱,至 2 小时后即可完全消退至 无色。TMB 的终止液有多种,叠氮钠和十二烷基硫酸钠(SDS)等酶抑制剂均可使反应终止。 这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间(12-24 小时)不褪,是目视判断的良好终止剂。此外, 各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色,此时可用特定的波长(450nm)测读吸光值。


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